Trong các nghiên cứu với sinh vật nước ngọt, độ cứng của nước ở 5 trong số 6 phòng thí nghiệm nằm trong khoảng từ 36 đến 75 mg/L.
Độ cứng của nước được nhận thấy không khác nhau nhiều giữa các phòng thí nghiệm.